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‣ Bacterial retropepsin-like proteases : the evidence from Legionella pneumophila

Teixeira, Paulo Alexandre Gonçalves
Fonte: Universidade de Coimbra Publicador: Universidade de Coimbra
Tipo: Dissertação de Mestrado
Português
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37.100828%
A2 family of aspartic proteases harbors mostly proteases found in retroviruses – the retropepsins. The evolution theories regarding these proteases usually state that these proteins are related to pepsin-like proteases from family A1 by two different hypotheses. By the first (and usually most accepted) theory, upon infection of a eukaryote cell by a retrovirus, the retropepsin gene would have integrated into the host’s genome and undergone a gene duplication and fusion event, giving rise to the first pepsin-like protease. The second theory would be that upon a virus infection of a eukaryote cell, half of a pepsin gene would be accidentally captured by the virus, evolving and creating the first retropepsin-like protease. Both theories neglected the possibility that these enzymes would exist in prokaryotes. Recently, through bioinformatics, several putative retropepsin-like and pepsin-like protease sequences have been found in prokaryotes, which challenge the evolutionary theories presented so far. In fact, it has already been experimentally proved the existence of the first pepsin-like protease in a prokaryote (shewasin A) and successfully characterized as an active aspartic protease. For this matter, the experimental validation regarding the existence of retropepsin-like aspartic proteases in prokaryotes needs to be addressed. Studies in our lab have already experimentally demonstrated the presence in Rickettsia of a highly conserved active aspartic protease with retropepsin-like signatures and features. However...

‣ Detecção de bactérias do gênero Legionella em amostras de água provenientes de sistemas de ar condicionado; Detection of bacteria genus Legionella in water samples of airconditioning systems [master degree]

Etto, Helder Yudji
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 16/06/2009 Português
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37.423281%
Introdução: Destaca-se a importância dos organismos do gênero Legionella como agentes causadores de doenças do aparelho respiratório como a legionelose ou doença do Legionário, e ainda de um controle na manutenção adequada de sistemas de ar condicionado, uma vez que estes foram identificados como ambientes favoráveis à proliferação desses microrganismos. Objetivo: Devido à importância de bactérias do gênero Legionella como agentes causadores de doenças, e um crescente número de casos de legionelose relacionados à permanência em ambientes fechados, este estudo teve como objetivo determinar a presença de Legionella em águas de bandejas de sistemas de ar condicionado. Métodos: Foram realizadas análises de amostras de água provenientes de bandejas de ar condicionado de dois hospitais, uma instituição de ensino superior e um centro comercial, totalizando 41 amostras. Volumes de 1L das amostras coletadas foram concentrados em membrana, seguida de tratamento ácido. Alíquotas das amostras tratadas e não tratadas com ácido, foram então inoculadas em meio Agar BCYE-, com e sem adição de antibióticos. As cepas isoladas foram submetidas a teste sorológico para identificação. Resultados: Das amostras analisadas...

‣ Ativação de caspase-1 e formação de poros em macrófagos infectados por Legionella pneumophila; Caspase-1 activation and pore formation in murine macrophages infected with Legionella pneumophila

Silveira, Tatiana Nunes
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 15/04/2010 Português
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37.265242%
Legionella pneumophila, o agente etiológico da doença dos Legionários, é conhecida por desencadear a formação de poro em membranas de macrófagos derivados de medula óssea (BMMs) por mecanismos dependentes do sistema de secreção do tipo IV conhecido como Dot/Icm. Neste trabalho, foram utillizados vários mutantes de L. pneumophila em combinação com camundongos nocautes para investigar os fatores bacterianos e do hospedeiro envolvidos na formação de poro em BMMs. Observamos que apesar da atividade do Dot/Icm, a formação de poro não ocorre em BMMs deficientes para caspase-1 e Nlrc4. A formação de poro foi temporalmente associada com a secreção de IL-1b e precedeu a lise celular e a piroptose. A formação de poro foi dependente do Dot/Icm, mas independente de várias proteínas efetoras, da multiplicação bacteriana e da síntese de novo de proteínas. A flagelina, a qual é conhecida em ativar o inflamassoma de Nlrc4, foi necessária para a formação de poro; a bactéria mutante flaA falhou em induzir a permeabilização celular. Consequentemente, a transfecção da flagelina purificada foi suficiente para desencadear a formação de poro independente da infecção. Utilizando 11 diferentes espécies de Legionella...

‣ Identificação dos componentes do Sistema Imune que participam na resistência de camundongos em modelo de infecção letal por Legionella longbeachae; Identification of Immune System components involved in mice resistance to Legionella longbeachae lethal infection

Manin, Graziele Zenaro
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 23/04/2014 Português
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37.348794%
A doença dos legionários consiste em uma broncopneumonia severa e atípica, que acomete de 2 a 7% das pessoas infectadas com Legionella spp e que apresenta taxa de mortalidade que varia de 5 a 30%, sendo considerada uma importante causa de morbidade e mortalidade mundial. A patologia causada pela espécie L. pneumophila tem sido amplamente estudada em modelos experimentais e suas características clínicas foram extensivamente descritas. No entanto, este modelo não representa adequadamente a doença que acomete seres humanos, pois L. pneumophila não é letal aos camundongos como é para humanos. Recentemente, uma nova espécie de bactéria do gênero Legionella, denominada Legionella longbeachae, foi descrita como importante agente de doença dos legionários em países do hemisfério sul. A pneumonia induzida por L. longbeachae em humanos não difere da induzida por L. pneumophila. No entanto, L. longbeachae é letal para camundongos em doses baixas, o que torna esse modelo murino de doença dos legionários mais fidedigno ao que ocorre com humanos. Com a acentuada mudança dos hábitos de nossa sociedade, há o aumento do número de pessoas com fatores que predispõe a doença, como idade elevada ou tratamento imunossupressor. Assim...

‣ Incidência de infecção por Legionella pneumophila em pacientes que internaram no HCPA com pneumonia adquirida na comunidade

Chedid, Maria Bernadete Fernandes
Fonte: Universidade Federal do Rio Grande do Sul Publicador: Universidade Federal do Rio Grande do Sul
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Português
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37.532666%
Introdução: O diagnóstico microbiológico da infecção por Legionella é complexo, pois a bactéria não é visualizada à coloração de Gram no escarro, e sua cultura não é realizada na maioria dos laboratórios clínicos. A imunofluorescência direta nas secreções respiratórias tem baixa sensibilidade, em torno de 40% e a técnica da “PCR” não é ainda recomendada para o diagnóstico clínico (CDC, 1997). A detecção de anticorpos no soro é a técnica mais utilizada, e o critério definitivo é a soroconversão para no mínimo 1:128, cuja sensibilidade é de 70 a 80% (Edelstein, 1993). Como critérios diagnósticos de possível pneumonia por Legionella, eram utilizados: título único de anticorpos a L pneumophila positivo na diluição 1:256, em paciente com quadro clínico compatível (CDC, 1990) e o achado de antígeno a Legionella na urina (WHO, 1990). Nos últimos anos, porém, com o uso crescente do teste de antigenúria, foram detectados casos de pneumonia por Legionella, que não eram diagnosticados por cultura ou sorologia, tornando-o método diagnóstico de certeza para o diagnóstico de pneumonia por Legionella (CDC, 1997). Por sua fácil execução, resultado imediato, e alta sensibilidade - de 86% a 98% (Kashuba & Ballow...

‣ Falsos positivos na detecção de Legionella spp. seguindo a norma UNE ISO-11731:1998

Borges, Anabela Portela
Fonte: Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro Publicador: Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro
Tipo: Dissertação de Mestrado
Português
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37.399368%
Dissertação de Mestrado em Biologia Clínica Laboratorial; As infecções provocadas por Legionella spp. são consideradas actualmente, um problema emergente de saúde pública e estão associadas a altas taxa de mortalidade e morbilidade, quando não tratadas adequadamente. Neste estudo foram analisadas 54 amostras de água provenientes de 8 concelhos da região Norte de Portugal, com a finalidade de obter uma colecção de estirpes do género Legionella e caracteriza-las tanto fenotipicamente como geneticamente. Sendo também objectivo deste trabalho, avaliar a eficácia da técnica de cultivo, método padrão de referência de acordo com a norma International Organization for Standardization 11731 (1998), na detecção de espécies de Legionella. O processamento laboratorial das amostras foi realizado segundo a metodologia recomendada pela ISO-11731:1998. Após filtração das amostras (1 litro), o colectado foi ressuspendido em 5 ml de água destilada estéril. Posteriormente, retirou-se 100 μl da suspensão e semeou-se em um meio selectivo, agar GVPC (BD BBL 257007), incubando-se 7 a 10 dias, a 37 ºC em condições aeróbias. Colónias morfologicamente características do género foram subcultivadas em agar BCYE (BD BBL 221808) e agar sangue...

‣ Estudo da expressão génica da Legionella pneumophila estirpe paris após co-cultura em Acanthamoeba castellanii

Cunha, Catarina Isabel Gaio da Silva
Fonte: Faculdade de Ciências Médicas Publicador: Faculdade de Ciências Médicas
Tipo: Dissertação de Mestrado
Publicado em //2013 Português
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37.325918%
RESUMO: A Legionella é um bacilo Gram-negativo que replica dentro de protozoários como Acanthamoeba castellanii (A. castellanii) e no interior de macrófagos alveolares humanos, podendo resultar numa pneumonia grave. A Legionella em meio líquido tem um ciclo de vida bifásico, apresentando traços replicativos na fase exponencial e expressando factores transmissíveis na fase estacionária. Estudos recentes demonstraram que a Legionella precisa de assegurar um tempo preciso no seu ciclo de vida para efectuar com êxito a infecção das células hospedeiras. Muitos modelos de estudo foram desenvolvidos a fim de aumentar o conhecimento sobre o ciclo de vida intracelular e identificar os genes necessários para a modulação da célula hospedeira. Embora o conhecimento sobre a interacção bactéria-hospedeiro ainda seja limitado, parece que esta interacção gera um conjunto de características de virulência permitindo que a bactéria infecte células fagocíticas humanas e cause doença. O objectivo do presente projecto de investigação foi investigar e seleccionar genes críticos para a infecciosidade da Legionella pneumophila estirpe Paris (Lp Paris), desenhar e optimizar uma técnica de PCR em tempo real para o estudo da expressão génica e comparar o perfil de expressão da Lp Paris antes e depois da co-cultura em A. castellanii. Os resultados mostraram que oito dos 12 genes em estudo alteraram a sua expressão relativa após co-cultura em A. castellanii quando os ensaios foram realizados com culturas de Lp Paris na fase estacionária precoce (cinco foram induzidos e três reprimidos) Quando os ensaios foram realizados com culturas de Lp Paris na fase estacionária tardia 11 genes apresentaram repressão na sua expressão relativa. Analisando os resultados...

‣ Detection of Legionella pneumophila in water and biofilm samples by culture and molecular methods from man-made systems in São Paulo - Brazil

Carvalho,Fábio R.S.; Foronda,Annette S.; Pellizari,Vivian H.
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2007 Português
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37.223804%
Legionella pneumophila is a pathogenic bacteria associated to aquatic habitat of natural and artificial environments. Clinical cases of legionellosis have been reported in Brazil but there is a lack of information about the incidence and concentration of this bacterium in environmental sources. Thus, the present study was designed to evaluate the occurrence of legionellae in São Paulo city, Brazil, using different methods of detection and identification. Sixty-seven water and biofilm samples from natural reservoirs and man-made systems were collected and analyzed for the presence of Legionella spp by culturing onto a selective medium, coculture in axenic free-living amoebae and direct fluorescent antibody (DFA) assay. Results showed that freshwater of reservoirs did not contain legionellae, Legionella pneumophila was isolated from man-made systems, with predominance of Legionella pneumophila serogroup 1 strains. Although there was no statistical difference among the proposed detection methods, the plate culture method yielded a higher number of L. pneumophila positive samples, followed by amoebic coculture procedure and direct fluorescent antibody assay. Results of PCR and sequencing reactions revealed that application of macrophage infectivity potentiator gene as a molecular marker was an important tool for the identification of environmental isolates of L. pneumophila. The agreement among the three detection methods-when all methods yielded similar results- and the prevalence of a single Legionella species in the sampled man-made systems could suggest that the occurrence of this bacterium had been influenced by the higher concentration of metallic ions dissociated in water of those systems than in natural reservoirs. Thus...

‣ Legionella Pneumophila Infection Presenting as Headache, Confusion and Dysarthria in a Human Immunodeficiency Virus-1 (HIV-1) Positive Patient: Case Report

Robbins, Nathaniel M; Kumar, Aditi; Blair, Barbra McDonagh
Fonte: BioMed Central Publicador: BioMed Central
Tipo: Artigo de Revista Científica
Português
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37.170854%
Background: Legionella pneumophila is a common cause of community-acquired pneumonia. Central nervous system dysfunction is common, and diagnosis in the absence of pulmonary symptoms can be challenging. Here we describe an atypical clinical presentation of Legionella infection in a patient with HIV who was found to have an unusual neuroradiologic lesion that further served to obscure the diagnosis. This is the first such description in a patient with Legionellosis and HIV coinfection. Case presentation: A 43 year-old HIV positive man presented to our hospital with dysarthria, fevers, headache, and altered mental status. Initial work-up revealed pneumonia and a lesion of the splenium of the corpus callosum on magnetic resonance imaging. He was subsequently diagnosed with Legionella pneumonia and treated with complete symptom resolution. Conclusions: Neurologic abnormalities are frequent in Legionellosis, but the diagnosis may be difficult in the absence of overt respiratory symptoms and in the presence of HIV coinfection. A high index of suspicion and early initiation of empiric antibiotics is imperative since early treatment may help prevent long-term sequelae. Neuroimaging abnormalities, though rare, can help the physician narrow down the diagnosis and avoid unnecessary invasive testing. Future studies should aim to elucidate the as yet unknown role of neuroimaging in the diagnoses and prognostication of Legionellosis...

‣ Legionella nagasakiensis sp nov., isolated from water samples and from a patient with pneumonia

Yang, G.; Benson, R.; Ratcliff, R.; Brown, E.; Steigerwalt, A.; Thacker, W.; Daneshvar, M.; Morey, R.; Saito, A.; Fields, B.
Fonte: Soc General Microbiology Publicador: Soc General Microbiology
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em //2012 Português
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37.265242%
A novel Legionella species was identified based on analysis of 16S rRNA and mip (macrophage infectivity potentiator) gene sequences, cellular fatty acids, isoprenoid quinones, biochemical reactions, antigens and quantitative DNA–DNA hybridization. Strain CDC-1796-JAP-ET was isolated from well water at the Nagasaki Municipal Medical Center, Japan. Two strains, CDC-3041-AUS-E and CDC-3558-AUS-E, were isolated from water samples during an outbreak of legionellosis in South Australia. Strain CDC-5427-OH-H was isolated from a 66-year-old female patient diagnosed with Legionnaires’ disease in the US. Cells from these four strains were Gram-negative, non-fluorescent, rod-shaped, and positive for alkaline phosphatase, esterase, leucine arylamidase, catalase, gelatinase, β-lactamase and tyrosine browning assay. Phylogenetic analysis of 16S rRNA and mip genes revealed that the four strains formed a distinct cluster within the genus Legionella. The bacteria contained branched-chain fatty acids and quinones that are typical of members of the genus Legionella. Slide agglutination tests demonstrated no cross-reaction with 52 previously described members of the Legionellaceae. DNA–DNA hybridization studies indicated that DNAs from the four strains were highly related (78–84 %) but they showed 29 % relatedness to Legionella oakridgensis ATCC 33761T and less than 10 % to strains of other Legionella species tested. These characterizations suggest that the isolates represent a novel species...

‣ Legionella steelei sp. nov., isolated from human respiratory specimens in California, USA, and South Australia

Edelstein, P.; Edelstein, M.; Shephard, L.; Ward, K.; Ratcliff, R.
Fonte: Soc General Microbiology Publicador: Soc General Microbiology
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em //2012 Português
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37.170854%
Legionella-like bacteria were isolated from the respiratory tract of two patients in California, USA, and South Australia, but were not thought to cause disease. These bacteria, strains F2632 and IMVS-3376T, were found to have identical Legionella macrophage infectivity potentiator (mip) gene sequences and were therefore further characterized to determine their genetic and phenotypic relatedness and properties. Both of these Gram-negative-staining bacterial strains grew on buffered charcoal yeast extract medium, were cysteine auxotrophs and made a characteristic diffusible bright yellow fluorescent pigment, with one strain making a late appearing colony-bound blue–white fluorescent pigment. The optimal in vitro growth temperature was 35 °C, with very poor growth at 37 °C in broth or on solid media. There was no growth in human A549 cells at either 35 or 37 °C, but excellent growth in Acanthamoeba castellani at 30 °C and poorer growth at 35 °C. Phylogenetic analysis of these bacteria was performed by sequence analysis of 16S rRNA, mip, ribonuclease P, ribosomal polymerase B and zinc metalloprotease genes. These studies confirmed that the new strains represented a single novel species of the genus Legionella for which the name Legionella steelei sp. nov. is proposed. The type strain is IMVS-3376T ( = IMVS 3113T = ATCC BAA-2169T).; Paul H. Edelstein...

‣ Phagozytose-assoziierte Rezeptoren bei der Legionellen-Pathogenese; Phagocytosis-associated receptors in Legionella pathogenesis

Weissgerber, Patrick
Fonte: Universidade de Tubinga Publicador: Universidade de Tubinga
Tipo: Dissertação
Português
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37.265242%
Legionella pneumophila ist ein Bakterium, das beim Menschen zu lebensbedrohlichen Pneumonien führen kann. Als zentraler Pathomechanismus wird die Fähigkeit zur intrazellulären Vermehrung angesehen. Obwohl in der Vergangenheit Komplementrezeptoren als ein Weg der Legionellen in menschliche Monozyten/Makrophagen beschrieben wurden, ist bis heute völlig unklar, in welchem Ausmaß diese Rezeptoren zur Adhärenz und Phagozytose beitragen. In der vorliegenden Arbeit sollten neben den Komplementrezeptoren 1 und 3 weitere Oberflächenmoleküle auf ihre Beteiligung bei der Aufnahme von L. pneumophila untersucht werden. In einem ersten Versuch wurde zunächst die Phagozytose und intrazelluläre Vermehrung der Legionellen in einer Monozyten-Zellinie bestätigt. Als Bakterien wurden in allen Untersuchungen die Wirtszell-adaptierte L. pneumophila Sg1 (frisches Patientenisolat, Lp1v) und die Agar-adaptierte L. pneumophila Sg1 ATCC 33152 (Lp1a) eingesetzt. Bei der Zellinie handelt es sich um die sehr weit differenzierte Monozyten-Linie Mono Mac 6. Diese Versuche wurden anschließend mit HeLa- und Jurkat-Zellen, die sich beide in ihrem Oberflächenrezeptor-Repertoire vor allem hinsichtlich der Komplementrezeptoren von Mono Mac 6 unterscheiden...

‣ Einfluss von Acanthamoeba castellanii und Hartmanella vermiformis auf die intrazelluläre Vermehrung von Legionellen in humanen Monozyten; Influence from Acanthamoeba castellanii and Hartmanell vermiformis on intracellular reproduction of legionella in human monocytes

Weiß, Tanja
Fonte: Universidade de Tubinga Publicador: Universidade de Tubinga
Tipo: Dissertação
Português
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37.170854%
Kennzeichnend für Legionellen ist ihre Fähigkeit zur intrazellulären Vermehrung. Die eukaryontischen Mikroorganismen Acanthamoeba castellanii und Hartmanella vermiformis stellen die häufigsten Wirte dar. Im Rahmen der vorliegenden Arbeit konnte ein System etabliert werden, in dem ein Überstand von Acanthamoeba castellanii im Large-Scale-Verfahren hergestellt werden kann, der auf intrazelluläre Legionelleninfektionen einen wachstumssteigernden Effekt besitzt. Die Vermehrungssteigerung ist unabhängig von Zell-Zell-Interaktionen. Es handelt sich bei dem bioaktiven Mediator, der die intrazelluläre Vermehrung von Legionellen steigert, um ein Produkt der Amöben, das diese unabhängig von Legionellen, Makrophagen oder anderen Spezies freisetzen. Weitergehend wurden in dieser Arbeit die physikalischen Eigenschaften des im Überstand enthaltenen bioaktiven Mediators untersucht.; A general characteristic of Legionella is their ability to reproduce intracellular. The most common hosts are the eucaryontic microorganisms Acanthamoeba castellanii and Hartmanella vermiformis. Central part of this work was the developing of a system to produce surfactant from Acanthamoeba castellanii and Hartmanella vermiformis in a large scale method. This surfactant has an increasing effect on the reproduction of intracellular Legionella infections. The increasing effect does not depend from cell-to-cell interactions...

‣ Zytolyse von Legionella pneumophila-infizierten Monozyten durch natürliche Killerzellen; Lysis of Legionella pneumophila-infected monocytes through natural killer cells

Ograbek, Agnieszka
Fonte: Universidade de Tubinga Publicador: Universidade de Tubinga
Tipo: Dissertação
Português
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37.170854%
Das Ziel dieser Arbeit war es, zu untersuchen, ob als Konsequenz der Reduktion der MHC-Klasse-I-Expression auf von L. pneumophila infizierten Monozyten eine Aktivierung der natürlichen Killerzellen erfolgt. Monozyten aus dem Buffy-coat gesunder Blutspender wurden mit L. pneumophila infiziert und die Lyse dieser Targetzellen durch natürliche Killerzellen (NK) mittels 51Cr-Release-Essay wurde ermittelt. Das Infektionsverhältnis von 1:1 war die niedrigste eingesetzte Infektionsdosis. Bei den Messungen 24 h nach der Infektion wies der Vergleich von infizierten mit uninfizierten Zellen kein einheitliches Muster der Zytolyse auf. Je nach Spender zeigte sich sowohl ein geringes Überwiegen der Lyse infizierter als auch der Lyse uninfizierter Monozyten. Die gleiche Beobachtung konnte bei Messungen 30 h nach der Infektion gemacht werden. 48-h-Werte konnten für die infizierte Fraktion nicht ermittelt werden, denn im Laufe der Vorversuche hat sich gezeigt, dass die einstündige Inkubationszeit der humanen Monozyten mit 51Cr nicht ausreicht, um eine gute Aufnahme in die Zelle zu gewährleisten. Erst bei einer Inkubationsdauer von 18 h konnte das Isotop in entsprechender Menge in den Zellstoffwechsel eingebaut werden. Dies und die Toxizität der Legionelleninfektion haben es nicht möglich gemacht...

‣ Legionella pneumophila - intrazelluläre Propagierung des LPS und Assoziation des Phagosoms mit dem endoplasmatischen Retikulum während der intrazellulären Vermehrung in humanen Monozyten; Legionella pneumophila - intracellular processing of LPS and association of the phagosome with the endoplasmic reticulum during intracellular replication within human monocytes

Mannowetz, Nadja
Fonte: Universidade de Tubinga Publicador: Universidade de Tubinga
Tipo: Dissertação
Português
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37.170854%
Da das LPS von L. pneumophila Sg 1 keine klassische Endotoxinfunktion aufweist und einen ungewöhnlichen strukturellen Aufbau hat, übernimmt diese Molekül mit großer Wahrscheinlichkeit andere Funktionen, wie beispielsweise Interaktion mit Wirtszellmembranen, die im Rahmen der vorliegenden Arbeit mittels Immunogoldmarkierungen herausgearbeitet werden sollten. Ein weiteres Ziel war es, die zeitlichen Abläufe, denen die Rekrutierung von endoplasmatischen Retikulum zu L. pneumophila-Phagosomen unterliegt, mit Hilfe konventioneller Elektronenmikroskopie genauer zu untersuchen, da hierfür bis dato nur spärliche Daten vorliegen. Zur Erfassung der LPS-Synthese dienten RT-PCR Studien mit acht daran beteiligten Genen. Es zeigte sich, dass sich das LPS von internalisierten Bakterien ablöste und an inneren Phagosomenmembranen ansammelte. Darüber hinaus war auch eine intrazelluläre Prozessierung dieses Moleküls in das Zytoplasma der Wirtszellen nachzuweisen. Weiterhin konnte gezeigt werden, dass die Rekrutierung des endoplasmatischen Retikulums zu L. pneumophila enthaltenden Phagosomen in zwei sich wiederholenden Zyklen verlief. Des Weiteren unterlag die LPS-Synthese in intrazellulären Legionellen einer Regulation, wohingegen die LPS-Synthese nicht reguliert war...

‣ Microbiological monitoring of water for control of Legionella

Coelho, Carla; Pizarro, Cristina; Reinas, Alcina; Rebelo, Helena
Fonte: Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IP Publicador: Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IP
Tipo: Conferência ou Objeto de Conferência
Publicado em 01/06/2012 Português
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37.298555%
Legionellosis is a collection of infections that are caused by Legionella pneumophila and related Legionella bacteria. The severity of legionellosis varies from mild febrile illness (Pontiac fever) to a potentially fatal form of pneumonia (Legionnaires’ disease) that can affect anyone, but principally affects those who are susceptible due to age, illness, immunosuppression or other risk factors, such as smoking. Legionella spp. are heterotrophic bacteria found in a wide range of water environments and proliferate at temperatures between 25°C and 45°C. These bacteria are members of the natural flora of many freshwater environments, such as rivers, streams and impoundments, where they occur in relatively low numbers. Bacteria of the genus Legionella are ubiquitous, they can proliferate in certain human-made water environments, such as water cooling devices associated with air conditioning systems, hot water, spas, distribution systems, on the inside surfaces of shower heads especially in warm waters. Legionellae can be ingested by certain amoebae which play an important role in their persistence in water environments. Devices that support multiplication of Legionella have been associated with outbreaks of Legionnaires’disease. Nosocomial cases usually make up a small proportion of reported cases of legionellosis. However...

‣ Legionella pneumophila: Tipatge molecular i descripció de diferències genotípiques i fenotípiques entre aïllats relacionats amb casos de legionel·losis i aïllats ambientals

Quero Blanca, Sara
Fonte: [Barcelona] : Universitat Autònoma de Barcelona, Publicador: [Barcelona] : Universitat Autònoma de Barcelona,
Tipo: Tesis i dissertacions electròniques; info:eu-repo/semantics/doctoralThesis; info:eu-repo/semantics/publishedVersion Formato: application/pdf
Publicado em //2015 Português
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37.298555%
Legionella és l'agent causant de la legionel·losis, una malaltia de declaració obligatòria. Quan es declara un brot de legionel·losis es realitzen estudis epidemiològic-moleculars per a la cerca del focus d'infecció. La tècnica ‘gold standard' per aquests estudis és el PFGE, però últimament s'està implementant la tècnica SBT, una nova tècnica molecular per la tipatge de Legionella. El protocol d'aquesta tècnica va ser descrit pel EWGLI (European Working Group of Legionella Infections). En el primer objectiu de la tesis es van comparar els poders discriminatoris d'aquestes dues tècniques en un context de brots. Es van analitzar un total de 25 brots, i com a resultat final es va obtenir que el PFGE és més discriminatori que l'SBT, a més de la necessitat d'utilitzar el criteri idèntics per a la diferenciació de patrons PFGE en un brot. Com a segon objectiu, es va analitzar la diversitat dels aïllats clínics i ambientals no relacionats amb casos de la regió de Catalunya amb la tècnica SBT i anticossos monoclonals de Dresden. Es va observar que els aïllats clínics eren majoritàriament positius per l'anticòs MAb 3/1, un marcador de virulència, mentre que els aïllats ambientals eren negatius per aquest. A més...

‣ Legionella pneumophila associada a insuficiência respiratória aguda: primeiro isolamento no Brasil; Legionella pneumophila associated to acute respiratory insufficiency: first isolation in Brazil

Gomes, João Carlos Pereira; Mazieri, Neusa Augusta de Oliveira; Godoy, Cid Vieira Franco de; Rocha, Antonino dos Santos
Fonte: Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo Publicador: Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo
Tipo: info:eu-repo/semantics/article; info:eu-repo/semantics/publishedVersion; ; ; ; ; Formato: application/pdf
Publicado em 01/12/1989 Português
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37.265242%
Relatam os autores isolamento de Legionella pneumophila sorogrupo 1, acompanhado de evidências sorológicas de infecção atual, em homem de 40 anos com infecção respiratória grave que evoluiu para insuficiência respiratória aguda. Esta foi caracterizada por hipoxemia severa refratária a altas concentrações de oxigênio e radiograficamente por infiltrados difusos em ambos pulmões. Com introdução de clindamicina, amicacina, ceftriaxone e ventilação à volume com Pressão Expiratória Positiva Final (PEEP) de 14 cm de H(2)0, houve estabilização do quadro e gradual recuperação. Suspeitando-se de legionelose, foi colhido sangue e secreção traqueal para exames específicos. A secreção traqueal foi semeada em meio BCYE com isolamento de bacilo gram-negativo, identificado como Legionella pneumophila sorogrupo 1 por características culturais, bioquímicas e reações de imunofluorescência direta e de aglutinação em lâmina. O estudo sorológico revelou títulos de anticorpos 128, 1024, 4096 e 8192 para amostras coletadas na 1ª, 3ª, 4ª e 6ª semanas após o início do quadro. Os resultados definitivos foram obtidos com o paciente em recuperação. É realçada a comprovação da presença de Legionella sp. como agente patológico em nosso meio; a importância das medidas de suporte na evolução do paciente; a necessidade de se pensar neste agente no diagnóstico diferencial de pneumonias e de se pesquisar mais esta etiologia com metodologia laboratorial específica.; Isolation of Legionella pneumophila sero group 1 with serological evidence of present infection is reported from a 40 year-old male with serious respiratory infection which developed into acute respiratory failure. It was characterized by severe hypoxemia resistant to high inspired oxygen concentrations and radiographycally by diffuse infiltrates in both lungs suggesting the clinical aspect of ARDS. Following the introduction of clindamycin...

‣ Comparison of conventional culture and real-time quantitative PCR using SYBR Green for detection of Legionella pneumophila in water samples

Fittipaldi,M; Codony,F; Morató,J
Fonte: Water SA Publicador: Water SA
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/07/2010 Português
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The genus Legionella comprises more than 40 species and 64 serogroups with approximately half of those species associated with human diseases. Legionella pneumophila Serogroup 1 is the most common pathogenic species and is responsible for up to 80% of legionellosis cases in the world. Legionella levels in water are assessed routinely by culture on a selective medium, but its slow growth is a serious drawback, given that at least 10 days are required to obtain results. In an attempt to provide a simple screening method for Legionella pneumophila in water systems samples a real time PCR assay using SYBR Green was developed. A total of 50 samples from cooling towers and hot tap water systems were analysed by DNA amplification using 2 pairs of primers targeting the mip and dot genes. Legionella pneumophila Serogroup 1 (NCTC12821) was used as a reference strain and to evaluate real-time PCR performance. The assays were successful with both primer sets; good and similar amplification efficiencies were achieved. In addition, high sensitivity was obtained; the method proved to allow for the detection of fewer than 10 gene copies per reaction. Results of real-time PCR were compared to conventional analysis based on culture. Although no strong correlation was observed between both methods and consequently real-time PCR could not substitute for the reference method...

‣ Detección de especies de Legionella en el agua utilizada en las unidades dentales: Maracaibo-Venezuela

Sandrea-Toledo,Lisette; Paz-Montes,América; Piña-Reyes,Eyilde; Sandrea-Fereira,María C; Navarro,Javiera; Chacín,María Paula
Fonte: Universidad del Zulia Publicador: Universidad del Zulia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/06/2009 Português
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La presencia de cualquier microorganismo en las aguas utilizadas en las unidades dentales constituye un grave peligro tanto para el paciente como para el personal que labora en dichas unidades. La presente investigación planteó dos objetivos: 1) Implementar y comparar dos técnicas de Análisis Microbiológico del agua para el estudio de las especies de Legionella; y 2) Detectar la presencia de Legionella en el agua utilizada en las piezas de mano de las clínicas odontológicas utilizadas por los estudiantes de Odontología de la Universidad del Zulia. Se estandarizaron dos técnicas comparativas: CDC y la ISO-11731, mediante el uso de muestras preparadas con una cepa de Legionella pneumophila ATCC 33155 y se realizó un estudio bacteriológico de 40 muestras del agua de cuatro (4) clínicas odontológicas docentes ubicadas en la Facultad de Odontología de LUZ, utilizando las dos metodologías antes mencionadas. Los resultaron mostraron que ambas técnicas resultaron sensibles para el aislamiento de Legionella en muestras de agua, siendo el tratamiento ácido más efectivo que el calentamiento. A pesar del uso de estas dos técnicas no se detectó la presencia de Legionella en ninguna de las muestras de agua analizadas. La presente investigación sirvió de base para la implementación de control de calidad relacionado con el aislamiento de Legionella en las aguas utilizadas a nivel hospitalario.